是一种用于研究RNA与蛋白质相互作用的试剂盒。在蛋白质组学中,研究蛋白质质量谱的发展带来了许多生物学信息。随着对于RNA和蛋白质相互作用研究的深入,RNA pull down试剂盒成为了研究RNA与蛋白质相互作用中的重要工具。
RNA pull down试剂盒的原理
RNA pull down试剂盒的原理是利用生物素标记的干扰素(biotinylated interferon)与相应RNA互相结合,在生物素般分子亲和素磁珠上结合和富集与其特异的RNA-RBP复合物,然后清洗以去除非特异性蛋白,并加入洗脱液溶解蛋白。最后用SDS-PAGE和质谱进行分析、鉴定。
RNA pull down试剂盒的优点
与其他技术相比,RNA pull down试剂盒具有多个优点:
1.特异性强:基于生长肌球 RNA运用 RNA辣根过氧化物酶联免疫法研究发现, 使用探测RNA分子水平绑定并富集相应的蛋白复合物,具有独特的优势。单独用一种RNA或RNA分子混合可目标式金属和催化剂、修复酶及其他蛋白等物种,同时又可深度地洗涤掉不特异的蛋白,从而实现显著提高特异性效果。
2.利用RNA标签分离:RNA标记中通常使用biotin,可以进行富集和纯化,标签绑定到RNA上,富集与RNA结合的蛋白复合物。使用RNA pull down试剂盒可以在单元实验及高通量筛选实验中轻松地富集富含RNA的复合物。
3.高灵敏性:RNA pull down试剂盒非常敏感,可检测非常低浓度数量的RNA结合蛋白。在屏幕大量样品或低浓度蛋白样本时,是检测低浓度蛋白样品最常用的方法。
4.简单易用:相比其他选择性高的方法,RNA-pull down试剂盒的操作步骤更简便,便于快速操作。同时,使用RNA pull down试剂盒还可以减少人工操作所带来的误差。
RNA pull down试剂盒的应用领域
RNA pull down试剂盒主要应用于研究RNA与蛋白质的相互作用,并已经在许多领域发现了很多潜在的应用价值。在一些领域,例如肿瘤和生殖领域,RNA pull down试剂盒已经被广泛应用,用于研究RNA与蛋白质的相互作用机制。此外,RNA pull down试剂盒还经常用于鉴定RNA组装中重要蛋白质,并分析其交互作用网络。